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NCG對(duì)育肥豬血清及肌肉中氨基酸水平的影響
發(fā)布時(shí)間：2021-10-18 關(guān)注：3005
精氨酸是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)攜帶氮多的氨基酸，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的代謝會(huì)產(chǎn)生大量的氨，精氨酸可促進(jìn)尿素循環(huán)，使血氨轉(zhuǎn)換為尿素排出體外，以維持體內(nèi)氮的平衡，其在動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)代謝及調(diào)控過程中起著重要的作用。 N－乙酰谷氨酸(NAG)是哺乳動(dòng)物肝臟尿素循環(huán)必需的一種特殊的輔酶因子，同時(shí)也是微生物和植物內(nèi)源精氨酸合成的第 一底物。但NAG在體內(nèi)半衰期較短，N－氨甲酰谷氨酸(NCG)作為NAG的結(jié)構(gòu)類似物，理化性質(zhì)穩(wěn)定，半衰期長(zhǎng)，成本低，且添加NCG不會(huì)干擾日糧中其他堿性氨基酸的吸收。NCG可以作為內(nèi)源精氨酸代謝激活劑，持續(xù)激活腸道中瓜氨酸的合成，促進(jìn)精氨酸的內(nèi)源合成。研究發(fā)現(xiàn)，外源添加NCG能提高母豬機(jī)體內(nèi)瓜氨酸、脯氨酸和亮氨酸的含量。但此類研究在育肥豬上比較少。 本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加不同水平NCG對(duì)育肥豬氨基酸含量的影響，探究其添加是否能夠促進(jìn)精氨酸的合成，從而促進(jìn)尿素循環(huán)，改善機(jī)體內(nèi)氨基酸平衡和蛋白質(zhì)代謝，為在生產(chǎn)中合理使用NCG提供理論依據(jù)。 材料與方法 NCG(純度≥97%)由亞太興牧公司提供。氨基酸采用高效液相色譜－四級(jí)桿離子阱串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。 試驗(yàn)動(dòng)物由新疆天康畜牧科技有限公司瑪納斯商品豬育肥基地提供。選擇420頭日齡接近的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬(70±3)kg，采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為4個(gè)處理，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，其他3個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%、0.1%和0.15%的NCG，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)35頭，保持性別的平衡。預(yù)飼期為3d，正試期為44d。 試驗(yàn)采取人工飼喂，自由采食不限飼。飼養(yǎng)管理遵循規(guī)模化豬場(chǎng)管理制度進(jìn)行，定時(shí)清掃豬圈和消毒，并保證舍內(nèi)清潔干燥、通風(fēng)良好，室溫控制在20～23℃。每天記錄舍內(nèi)溫度，觀察豬群采食情況、糞便及健康狀況。發(fā)現(xiàn)病殘豬現(xiàn)象及時(shí)剔除，剔除時(shí)需稱重，并記錄飼喂日期。試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（見表1）： 血清中氨基酸濃度的測(cè)定 在正試期第44天早上稱重后，每個(gè)處理隨機(jī)挑選2頭，每組6頭于前腔靜脈采取血液樣品30mL，室溫下靜止1～2h，之后4℃、3000r/min條件下離心10min，分離血清，置于－20℃下保存。血清樣本測(cè)定游離氨基酸稀釋后使用。取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)、待測(cè)樣本50μL加50μL蛋白沉淀劑，混勻后13200r/min冷凍離心4min。取上清10μL，加50μL標(biāo)記緩沖液混勻，瞬離。再加20μL衍生液混勻、瞬離后置55℃恒溫衍生15min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離，取50μL上機(jī)檢測(cè)。 肌肉中氨基酸濃度的測(cè)定 采血后，每組隨機(jī)挑選6頭育肥豬進(jìn)行屠宰，采取背長(zhǎng)肌。肌肉樣本測(cè)定氨基酸濃度采用酸水解的方式進(jìn)行測(cè)定。取適量樣本，加10mL6mol/L鹽酸，充氮?dú)獗Ｗo(hù)，密封110℃消化21h。后取160μL消化液加200μL5mol/L的NaOH中和待用。取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)、待測(cè)樣本50μL加50μL緩沖液A，混勻后13200r/min冷凍離心4min。取上清10μL，加50μL緩沖液B混勻，瞬離。再加20μL衍生液混勻、瞬離后置55℃恒溫衍生15min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離，取50μL上機(jī)檢測(cè)。1.5數(shù)據(jù)處理采用Excel和SPSS20.0軟件進(jìn)行整理和方差分析，對(duì)于差異顯著的處理采用LSD法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。P＜0.05為差異顯著。
結(jié)果與分析
1.日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬血清氨基酸濃度的影響 由表2可知，日糧中添加不同含量的NCG，血清中的絲氨酸、組氨酸和谷氨酰胺濃度顯著上升(P＜0.05);日糧中添加0.1%的NCG，半胱氨酸濃度顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);精氨酸和蛋氨酸濃度隨著NCG添加量的升高呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，但差異不顯著(P＞0.05)。 2.日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬肌肉氨基酸濃度的影響 由表3可知，日糧中添加不同含量的NCG，肌肉中的氨基酸濃度均無顯著差異(P＞0.05)，其中添加0.05%NCG組氨基酸濃度及總氨基酸濃度均比對(duì)照組高。必需氨基酸與非必需氨基酸之比為0.75，比對(duì)照組低0.08。 日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬血清氨基酸濃度的影響 精氨酸是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)合成一氧化碳的唯 一前體物，精氨酸和一氧化碳都具有激活mTOR通路的功能，通過促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)的目的。NCG是精氨酸的衍生物，其價(jià)格低廉，且能夠促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體精氨酸的內(nèi)源合成，終改善育肥豬生長(zhǎng)性能，提高經(jīng)濟(jì)效益。血清中游離氨基酸含量在一定程度上可以反映動(dòng)物體內(nèi)氨基酸代謝功能，當(dāng)飼糧氨基酸不能滿足動(dòng)物需要時(shí)，血清游離氨基酸含量偏低。 有研究表明，通過給哺乳仔豬每天灌服50～100mg/kg體重的NCG，血漿精氨酸濃度顯著提高。周笑犁等研究表明，飼糧中添加0.1%NCG顯著提高了環(huán)江香豬的平均日增重，降低了料重比；提高了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和干物質(zhì)的表觀消化率;同時(shí)也顯著提高了血漿堿性磷酸酶活性和總氨基酸、必需氨基酸、芳香族氨基酸、苯丙氨酸和蛋氨酸的濃度，降低了血漿尿素氮、血氨和低密度脂蛋白的濃度。 本研究在育肥豬飼糧中添加0.1%的NCG后，血清精氨酸濃度提高了8%，可能是因?yàn)樘砑舆m宜劑量的NCG能夠促進(jìn)機(jī)體內(nèi)源性精氨酸的合成。必需氨基酸/非必需氨基酸比值是反映動(dòng)物影響狀況的重要指數(shù)。添加0.1%的NCG組育肥豬血清中總氨基酸和必需氨基酸含量增加，表明必需氨基酸的補(bǔ)給更充足，從而為機(jī)體蛋白質(zhì)沉積和生長(zhǎng)發(fā)育提供必需的物質(zhì)來源，有利于機(jī)體氨基酸平衡及蛋白質(zhì)沉積。 日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬肌肉氨基酸濃度的影響 豬肉中氨基酸的組成和含量是評(píng)定豬肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)，也是影響蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要因素。蛋白質(zhì)缺少某種必需氨基酸或某種必需氨基酸含量過低，會(huì)影響其他氨基酸的利用，進(jìn)而也會(huì)降低蛋白質(zhì)的利用率。肌肉中谷氨酸和天冬氨酸等酸性氨基酸在豬肉烹飪過程中形成鮮香味。 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，添加0.05%的NCG，谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和天冬氨酸的含量高于對(duì)照組，但差異不顯著，這說明添加NCG對(duì)提高豬肉風(fēng)味方面效果并不顯著，具體機(jī)理暫不明確，有待進(jìn)一步研究。
